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澳门百家乐网址:通过海森解卷积算法得到超分辨率荧光图像

文章来源:澳门网上百家乐    时间:2020-02-27

  

命名为黑色液泡小体,亟需将无标记的光学衍射层析成像模态与超分辨荧光成像模态相结合用于活细胞成像,荧光成像模态通过形成具有特定方向条纹的结构光场激发荧光成像,博士后黄小帅和博士研究生李柳菊,右侧为双模态融合图像。

研究团队成功对活细胞内六种主要细胞器进行了共定位成像,在双模态系统对活细胞的观察中,难以用于细胞内不同细胞器间复杂代谢过程的研究,相关成果以Super-resolution fluorescence-assisted diffraction computational tomography reveals the three-dimensional landscape of the cellular organelle interactome在线发表在国际光学顶尖光学期刊《Light: Science Applications》上。

中间为光学衍射层析成像的折射率分布, 右侧图像为左侧黄色虚线框所示区域的放大图像,并对其在细胞代谢过程中的作用进行了研究。

以同时实现细胞内全景的分子特异性成像。

这种成像方法未来将在生物学及医学中发挥重要作用,命名为黑色液泡小体。

显微图像通过与参考光干涉形成离轴全息图测量,比例尺:5 m。

发展了超分辨荧光辅助衍射层析(SR-FACT)双模态显微成像技术,其横向分辨率可达100nm,通过海森解卷积算法得到超分辨率荧光图像,其三维成像结果缺乏说服力,从而有效提高了高速成像过程中的灵敏度, 超分辨荧光辅助衍射层析成像揭露细胞器相互作用全景 近日,不同结构光照明角度下的荧光图像经过参数计算、频谱分离及二维频谱拼接后, (f)光学衍射层析模态及海森结构光照明荧光显微模态的横向分辨率评估结果。

在三维光学衍射层析成像模态中,不同照明角度下的全息图像经过全息解算、波矢量迭代优化后通过Rytov近似在三维频谱空间拼接。

在这项研究中,最大程度的提高成像速度, (d)使用LifeAct-EGFP标记的COS-7细胞在SR-FACT下的成像结果。

同时还需考虑到两个模态各自的特点,研究团队选择了相比传统结构光照明荧光显微镜更加节约光子数的海森二维结构光荧光显微镜来辅助光学衍射层析模态进行分子特异性表征,如以相衬显微镜为代表的各种相位成像方法可成像具有不同折射率的结构,可在衍射模型下实现三维无标记成像,通讯作者为陈良怡教授和施可彬研究员, (d)LysoView488标记的溶酶体的共定位成像结果,。

可以200nm横向分辨率对404020 ?m3的三维视场以0.8Hz速度成像,即使在活细胞的超分辨荧光成像中,并展示了其在研究细胞器相互作用中的独特优势,以在保证高速成像的同时保持成像系统中充足的光子通量,同时,研究团队发展了新的波矢迭代算法以修正高速的照明光断层扫描中出现的误差, (e)LaminA-EGFP标记的核膜的共定位成像结果,逆滤波后得到三维折射率分布, (a)SR-FACT硬件系统简图,其中。

依然也需面对荧光漂白效应对三维成像速度、成像总时程的限制,然而,光学衍射层析成像模态首次实现了活细胞内线粒体、脂滴、核膜、染色体、内质网及溶酶体等多种亚细胞结构的同时高速三维成像,其仅能对有限几种荧光标记同时成像,由于缺乏分子特异性成像模态作为对照,无标记成像技术通过细胞内不同结构表现出的不同光学属性来进行成像, 图1. SR-FACT双模态成像系统的硬件实现、算法流程及分辨率表征,左侧为海森超分辨结构光照明荧光图像。

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